高产信号分子AI-2乳酸菌的筛选及其Pfs基因的克隆和表达

【目的】从锡盟地区酸马奶酒分离的乳酸菌中筛选出高产信号分子自体诱导物2(Autoinducer-2,AI-2)的乳酸菌,通过优化其重组蛋白Pfs的诱导条件体外合成信号分子AI-2。【方法】利用生物学发光法对不同乳酸菌产信号分子AI-2的产量进行比较,以高产信号分子AI-2乳酸菌基因组DNA为模板,扩增其S-腺苷高半胱氨酸核苷酶(S-adenosylhomocysteine nucleosidase,Pfs)基因,构建原核表达载体。利用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)进行重组蛋白的诱导表达,通过优化培养基、诱导温度、诱导前菌体密度、IPTG浓度以及诱导时间得到高表达的Pfs蛋白,使其与底物作用最终体外合成信号分子AI-2。【结果】10株乳酸菌均可产信号分子AI-2,其中屎肠球菌8-3分泌信号分子AI-2的产量明显高于其他菌株;重组蛋白的最佳诱导条件为:选取SOC(Super optimal broth with catabolite repression)作为诱导表达培养基,菌液OD600为0.5–0.7时加入终浓度为0.1 mmol/L的IPTG,37°C诱导12 h;利用最优诱导条件获得了浓度为4.08 g/L的纯化Pfs蛋白,体外合成了信号分子AI-2。【结论】酸马奶酒中分离出的10株乳酸菌均可产生信号分子AI-2,且屎肠球菌8-3可通过Pfs基因的作用生成信号分子AI-2。     

与草菇原基形成相关的过氧化物酶基因VvDyP的结构与表达分析

DyP-type过氧化物酶作为氧化物酶家族中的一员,参与了菌体氧化应激调节反应以及基质降解等过程。本研究从草菇基因组中获得一个DyP-type 过氧化物酶的编码基因,将其命名为VvDyP。对该基因进行结构分析,结果显示草菇的DyP-type 过氧化物酶编码基因全长为 2 333bp,含有8个外显子,7个内含子;开放阅读框长为1 485bp,编码494个氨基酸。通过系统发育分析发现它与灰盖鬼伞以及糙皮侧耳DyP蛋白同源性最高;分析DyP-type 过氧化物酶编码基因在草菇各个时期的表达谱情况并进行荧光定量PCR实验验证发现,草菇的DyP-type过氧化物酶编码基因只在原基中高表达,推测DyP-type过氧化物酶编码基因可以清除过量的活性氧自由基以保证原基的正常形成。     

兰州鲇线粒体Cytb基因的克隆与序列分析

为克隆兰州鲇（Silurus lanzhouensis）线粒体Cytb基因全序列,根据欧洲鲇（Silurus glanis）线粒体基因全序列设计特异引物进行兰州鲇线粒体Cytb基因的PCR扩增,得到1138 bp兰州鲇线粒体Cytb基因序列。对兰州鲇和其他13种鱼的线粒体Cytb基因核苷酸和氨基酸序列之间进行同源性比较,结果显示具有较高的同源性,核苷酸同源性介于61.38%-91.12%,氨基酸同源性介于76.62%-95.52%。对兰州鲇、欧洲鲇、大口鲇（Silurus meridionalis）、鲇（Silurus asotus）、越南鲇（Silurus cochinchinensis）的Cytb基因之间进行碱基替代分析,结果显示兰州鲇Cytb基因与鲇之间替换率最低,值为8.87%,转换/颠换值为3.21;与越南鲇之间替换率最高,值为14.41%,转换/颠换值为1.83。对本文克隆的兰州鲇Cytb基因与王庆容等测定的兰州鲇线粒体Cytb序列进行序列差异分析,结果显示两者之间替换率为11.16%,存在127个变异位点,转换/颠换比为4.08,遗传距离为0.1230。由NJ法基于兰州鲇和其他13种鱼的Cytb基因序列构建的系统进化树,结果显示与传统的分类地位基本吻合。       

三江源区不同退化程度高寒草原土壤呼吸特征

为了研究高寒草原退化对土壤呼吸的影响, 对三江源区不同退化程度的高寒草原土壤呼吸进行了测定, 分析了土壤呼吸与生物量、土壤温度以及土壤湿度的相关性, 结果表明: 1)不同退化程度的高寒草原土壤呼吸均表现出一定的月动态, 这种月动态在不同退化程度间各有不同。2)高寒草原在退化演替序列上生长季平均土壤呼吸速率呈先增加后降低的变化趋势, 其中在中度退化程度下达到最高值((2.46 ± 0.27) μmol·m^-2·s^-1), 显著高于未退化((1.92 ± 0.11) μmol·m^-2·s^-1)和重度退化((1.30 ± 0.16) μmol·m^-2·s^-1)水平(p < 0.01), 与轻度退化((2.22 ± 0.19) μmol·m^-2·s^-1)无显著差异(p > 0.05), 重度退化程度下呼吸速率显著低于其他退化水平(p < 0.01)。3)地上生物量和土壤呼吸存在极显著线性正相关关系(p = 0.004), 而地下生物量与土壤呼吸的相关性不很显著(p = 0.056)。4)除重度退化外, 未退化、轻度退化和中度退化高寒草原土壤呼吸与土壤温度显著正相关; 土壤呼吸与土壤湿度的二项式拟合方程在轻度退化程度下达到显著水平(p < 0.05), 而在未退化、中度退化和重度退化程度下均达到极显著水平(p < 0.01)。     

猪肥胖基因5'调控区与内含子1的测序分析及其两个新微卫星的发现

根据猪肥胖基因(Obese gene,Ob)部分序列设计引物,并通过Southern杂交和杂交阳性片段的克隆进行测序,首次得到猪Ob基因内含子1和5'调控区16.4 kb序列,将外显子1定位在起始密码子上游11.1 kb处,同时在内含子1中发现了两个新的微卫星,命名为SW200和SW160.调控区潜在的调控元件分析显示,-1～ -300 bp区间包含了C/EBP和两个Sp1,可能更直接高效的调节其转录.为研究SW200和SW160与一些重要经济性状的关系,分析了等位基因和基因型频率,用SAS8.2软件分析显示,两个微卫星多态仅对二花脸猪的头胎总产仔数有显著的效应.     

陕西延安北洛河流域蝶类资源调查及区系研究

通过对延安北洛河流域的蝶类资源进行调查,发现该地区共有蝴蝶6科54属75种(凤蝶科2属3种、粉蝶科7属10种、眼蝶科10属13种、蛱蝶科15属25种、灰蝶科11属15种、弄蝶科8属9种),其中34种为单属种,陕西省新纪录5种;区系结构分析表明该地区蝴蝶以古北种为主。标本保存于延安大学生命科学学院标本馆。     

水栒子的组织培养与快速繁殖

1 植物名称 水枸子(Cotoneaster multiflorus Bunge). 2 材料类别 茎尖和茎段. 3 培养条件 基本培养基为MS.诱导培养基:(1)MS+6-BAl.0 mg-L-1(单位下同)+NAA 0.2;继代培养基:(2)MS+6.BA 0.5+NAA 0.5,(3)MS+6-BA0.1+NAA 0.1;生根培养基:(4)1/2MS+IBA 0.5+NAA 0.1.     

低磷和高照度光下两种不同磷效率玉米幼苗的几种光合参数变化

以完全培养液（HP,1000μmol&#183;L^-1KH2PO4）培养15d的玉米自交系KH5（磷高效）和SD502（磷低效）幼苗转入低磷（LP,5μmol&#183;L^-1KH2PO4）条件下培养20d后,检测叶中几种与光合作用有关参数的结果表明,低磷下两自交系玉米叶中无机磷含量、植株生物量和叶片的净光合速率（Pn）均下降,KH5的降幅小于SD502。两自交系玉米叶片以高照度光（1600μmol&#183;m^-2&#183;s^-1）照射1h后,叶片的PSII实际光化学效率（ФPSII）、PSII最大光化学效率（Fv/Fm）和表观光合电子传递速率（ETR）均下降,而初始荧光（F0）、非光化学猝灭（NPQ）和天线热耗散（HDR）均升高。在强光胁迫过程中,玉米幼苗叶片发生光抑制,自交系SD502在低磷下的光抑制比KH5严重。     

陕西吴起县生态恢复区直翅目昆虫的多样性

应用多样性指数、主成分分析及多元逐步回归等方法,对陕西吴起县生态恢复区直翅目昆虫的群落结构,植被因素与直翅目昆虫群落特征的相关性进行研究。共获得标本1 155号,隶属于10科17属,共计20种。黄胫小车蝗Oedaleus infernalis Saussure,宽翅曲背蝗Pararcyptera microptera meridionalis,短星翅蝗Calliptamus abbreviatusIkonn分别占总数量的17.58%,15.15%和14.89%,共同构成该地区直翅目昆虫的优势类群。多样性的变化趋势是县城>白豹>周湾>王洼。对各生境植被因素和直翅目昆虫群落所进行的主成分分析,两维主成分的累计方差贡献率分别达到了95.299%和86.304%。影响直翅目昆虫种类和数量变化的植被因素有草本植物高度多样性、草本植物种数、菊科优势度、禾本科优势度、其他科优势度。